生长圈、抑制圈、透明圈、变色圈的原理是什么?在菌种选育中起什么作用?

2)用变色圈法将指示剂直接混入固体培养基中,对待筛选的菌悬液进行单菌落培养,或喷洒在已培养成分散单菌落的固体培养基表面,使菌落周围形成变色圈。如将一定浓度的淀粉酶产生菌的菌悬液涂布在含有淀粉的培养皿中,使其成为单菌落,然后喷洒稀释的碘溶液,产生显色反应。变色圈越大,菌落产酶能力越强。从变色环的颜色可以大致判断水解产物。

3)透明圈法在固体培养基中渗入溶解性差、可被特定细菌利用的营养物质,造成培养基背景浑浊不透明。待筛选的菌落周围会形成一个透明圈,透明圈的大小反映了菌落对这种物质的利用能力。向培养基中添加可溶性淀粉、酪蛋白或CaCO3可分别用于检测产生淀粉酶、蛋白酶或酸的能力。

4)生长圈法利用一些有特殊营养需求的微生物作为工具菌。如果待分离的细菌在缺乏上述营养物质的情况下,能够合成营养物质或分泌酶将营养物质的前体转化为营养物质,那么工具菌就会在这些细菌周围生长,在菌落周围形成生长圈。这种方法通常用于培育生产氨基酸、核苷酸和维生素的菌株。工具菌往往是相应的营养缺陷型菌株。

5)抑制圈法待筛选的菌株可以分泌一些能够抑制工具菌生长的物质,或者可以分泌一些酶,将无毒物质水解成对工具菌有毒的物质,从而在工具菌不能生长的菌落周围形成一个抑制圈。例如,用穿孔器将培养的单菌落连同周围的小块琼脂一起取出,以避免其他因素的干扰,然后转移到无培养基平板上4-5天,使抑制剂积累,然后转移到涂有工具菌的平板上,每个琼脂块中心之间的距离为2 cm。过夜培养后会出现抑菌圈。抑菌圈的大小反映了琼脂块中积累的抑制剂浓度。这种方法常用于筛选抗生素产生菌,工具菌往往是抗生素敏感菌。由于抗生素的分泌处于微生物生长的后期,取出琼脂块可以避免各菌落产生的抗生素相互干扰。一个典型的例子是春雷霉素产生菌的筛选。